目前，全球范围内已有18款双特异性抗体（BsAb）获批上市，以肿瘤治疗居多，其中CD20×CD3占比最高（4款），与此同时，随着抗体工程技术的进步和作用机制的不断深入，三特异性抗体（Trispecific Antibodies，TsAbs）通过同时靶向肿瘤细胞或免疫效应细胞上的三个不同抗原表位，成为肿瘤治疗领域一项重要的创新突破。三特异性抗体（TsAb）和多特异性抗体（MsAb）成为下一代抗体疗法的有力竞争者。

TsAb的优势与布局

相较于传统的单抗和双抗，三抗能够同时靶向三个不同的抗原或受体，提供更精准、更高效的治疗方式，特别是在肿瘤免疫、细胞治疗和自身免疫疾病等领域展现出巨大潜力。目前，包括Sanofi、Amgen、Roche、Genentech、Johnson&Johnson、Pfizer等全球知名生物制药公司均在布局三特异性抗体的开发，并已有候选药物进入临床试验阶段。

图1 全球三特异性抗体研发进展

TsAb临床研究阶段的设计方式

目前，进入到临床研究阶段的三特异性抗体约39款，其中主要的设计方式包括：

• T细胞接合抗体（T Cell Engager, TCE）增强T细胞活化，并促进T细胞在肿瘤部位聚集。
• NK细胞接合抗体（NK Cell Engager, NKCE）增强NK细胞介导ADCC作用。
• 免疫检查点阻断（Immune Checkpoint Blockade）解除肿瘤微环境的免疫抑制，增强免疫疗效。
• 靶向多个肿瘤抗原（Targeting Three TAAs）提高抗体的特异性和杀伤效果。
• 血清白蛋白（HAS）结合策略（HSA Application） ，通过血清白蛋白增加抗体稳定性，显著延长血清半衰期，提高药物稳定性，减少给药频率。

图2 进入临床研究的三特异性抗体靶点汇总

TsAb工艺难点及应对策略

三特异性抗体由于其结构复杂、生产工艺要求高、稳定性挑战大，在工艺开发过程中仍面临诸多技术难点。首先，细胞株构建是三特异性抗体开发的关键起点，由于其复杂的结构和独特的设计，需要针对性地设计细胞株开发的策略。细胞株开发阶段周期较长，在前期设计更充分的实验进行研究，可最大程度降低后续开发的风险和难度，从而避免项目时间的延期。具体来说，三特异性抗体可以分为对称和不对称两类，对称类的三抗通常可能具有较大的分子量，从而对于细胞来说表达难度增大，需特别关注表达上的风险。而针对非对称类抗体来说，最大开发问题在于对于同源二聚体杂质，如果能设计实验，在细胞株开发阶段就将同源二聚体的比例降低，那对于未来纯化工艺开发难度的降低至关重要。因此，我们常常会针对非对称抗体设计载体比例的测试实验，确认不同链在细胞中的表达情况，平衡抗体两边的表达，从而减少表达失衡导致的同源二聚体形成的情况。在这一优化过程中，分析方法开发也需要快速介入，开发相关方法来识别同源二聚体。同时，用于分离同源二聚体的分析方法的原理，也可以在一定程度上指导后续纯化工艺的开发。除了同源二聚体的杂质之外，在纯化的工艺优化过程中，针对TsAbs可能包含scFv片段、Fab片段、VHH片段或聚集体，传统层析平台方法并不总是适用，因此需要筛选更多的层析填料，同时也需关注产品中间品的稳定性。

面对可能遇到的工艺问题，在我们的实际交付中，针对三特异性抗体等多特异性抗体形成了平台化的细胞株开发、纯化工艺开发以及分析方法开发的策略，并实际运用到多个项目中，确保抗体产品在产业化过程中具备卓越的质量控制和稳定的生产性能。

关于康日百奥Bioworkshops

康日百奥Bioworkshops是一家专业的生物药CDMO，位于苏州工业园区东旺路5号。公司服务范围包括生物药工艺开发、cGMP原液生产、无菌制剂灌装等。团队成员均为经验丰富的生物制药行业资深人士，对生物药CMC领域有着深刻的理解。康日百奥Bioworkshops原液产能13000L，同时拥有包含西林瓶水针，冻干、卡式瓶、预充针、注射笔等的无菌制剂灌装服务，可完全实现从早期临床前样品生产至商业化生产的高效衔接。

康日百奥Bioworkshops已成功帮助多个合作伙伴的单抗、双抗、多抗、ADC、融合蛋白、细胞因子等项目获得中国、美国、澳大利亚等的临床批件。

康日百奥Bioworkshops致力于为全球合作伙伴提供高效、高质量的生物药外包服务解决方案，帮助合作伙伴缩短药物进入临床试验和上市的时间。

公司业务范围：

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