细胞株开发
为了获得高效稳定的细胞株，助力生物药快速开发，康日百奥选择与专业的细胞株开发供应商合作，拥有多个来源清晰的CHO宿主细胞平台。我们的细胞株开发负责人将参与细胞株构建方案和筛选过程关键指标的评估。根据客户提供的cDNA载体或抗体序列，提供从表达载体构建到筛选出蛋白质量符合要求的稳定高表达细胞系的服务。
为了获得高效稳定的细胞株，助力生物药快速开发，康日百奥选择与专业的细胞株开发供应商合作，拥有多个来源清晰的CHO宿主细胞平台。我们的细胞株开发负责人将参与细胞株构建方案和筛选过程关键指标的评估。根据客户提供的cDNA载体或抗体序列，提供从表达载体构建到筛选出蛋白质量符合要求的稳定高表达细胞系的服务。
载体构建
细胞转染
细胞pool / Mini-pool筛选
单克隆筛选
建立RCB
RCB稳定性研究
申报资料的撰写
瞬转蛋白制备服务
细胞株开发是CMC阶段的第一步，也是工艺开发的基础，细胞株开发决定了最终的产物质量。相比于单抗，双抗的细胞株开发项目工作量较大，开发时间也会相对较长。如何在细胞株表达量，产物质量以及开发时间这三个方面找到平衡点，是双抗细胞株开发过程中必须面临的挑战。康日百奥以稳健的工艺交付了包含单克隆抗体，双特异性抗体（对称+非对称）、融合蛋白等的细胞株构建项目，伴随高表达，可放大性，良好的细胞株稳定性，进入到后续CMC开发阶段，并顺利通过美国，澳大利亚，中国的临床研究申请。不仅如此，康日百奥也能在合作伙伴的Discovery阶段接入，利用CMC平台帮助进行候选分子的可开发性研究，缩短开发周期，减少项目CMC阶段开发的风险，以稳健的工艺，高效的生产将分子快速的推进临床。
康日百奥细胞株开发团队基于多年的构建经验，已经优化出具有平台化的双抗细胞株开发流程，筛选基数在Mini-pool和单克隆阶段分别达到300-1200个以及150-600个，对于筛选出单克隆细胞的表达量，质量和稳定性都更有保证，并降低了杂质对后续纯化工艺带来的挑战。图为2021-2022年度部分双抗项目表达量展示。
康日百奥可以提供具有商业化授权的ATCC CHO-K1，Merck CHOZN® CHO-K1等清晰溯源的多平台宿主细胞，通过对关键质量属性的关注，构建稳健的细胞株开发平台，致力于为客户的生物药开发提供高质量的符合cGMP要求的细胞株建库服务。从目的序列接收到单克隆筛选完成，最快可在4个月内完成交付。
康日百奥的CHO-K1宿主细胞具有优秀的可放大性，在不同培养规模上均能表现出高度可比的质量相似性。并且，对于交付单克隆细胞株的稳定性，康日百奥均能保证至少2株以上的细胞能够拥有超过60个世代的稳定性，不论是表达水平，蛋白质量还是基因水平稳定性。
Step 1
载体构建
选择适合的载体
密码子优化
基因合成
质粒构建
目的序列测序
Step 2
细胞转染和细胞pool / Mini-pool筛选
选择适合的转染条件
检测转染后48h表达量
细胞pool/Mini-pool铺板
优选pool/Mini-pool FB评价
优选pool/Mini-pool质量分析
Step 3
单克隆筛选
优选pool/Mini-pool进行单克隆铺板
单克隆成像
优选单克隆FB评价
优选单克隆质量分析
Step 4
建立RCB和RCB稳定性研究
建立30支的RCB
RCB支原体检测
60PDL的摇瓶稳定性传代研究
每隔15~20个PDL 进行FB评估
起点和终点的样本的质量检测
起点和终点的样本的遗传稳定性测试 (拷贝数和目标基因测序）
清晰来源的宿主细胞
稳定性
高表达
可放大性
